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[color=Black][size=4][font=楷体_GB2312]甲基化检测方法(亚硫酸氢盐修饰后测序法) [转自 丁香园论坛]
甲基化是目前的研究热点,就我所做的一点工作并其中一点心得,与大家分享。希望能够对大家
2011年09月02日发布人:finger
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[size=2][font=Impact][color=Black]目的:1.DNA甲基化处理,2.甲基化特异PCR
已试方法:
利用chemicon 公司的CpGenome™ DNA Modification Kit 进行甲基化
2016年04月08日发布人:阿福
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[size=2]之前都是用细胞的DNA来做BSP的,最近要做MSP,样本是人外周血DNA,阳性对照的问题,有的protocol是要先将人外周血白细胞genomic DNA酶切后用M.SSS1 酶处理得到阳性对照,有的没有酶切直接用
2016年02月10日发布人:铜雀
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都知道DNA甲基化能抑制基因表达,但是为什么?,DNA甲基化能引起染色质结构、DNA构象、DNA稳定性及DNA与蛋白质相互作用方式的改变,从而控制基因表达。
比如:甲基化会促使异染色质化,DNA构象改变(如Z型-B型之间的
2013年12月20日发布人:ssonglikihi
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[color=Black][size=2]之前都是用细胞的DNA来做BSP的,最近要做MSP,样本是人外周血DNA,阳性对照的问题,有的protocol是要先将人外周血白细胞genomic DNA酶切后用M.SSS1 酶处理得到阳性对照
2016年02月29日发布人:社会主义好
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[size=4][color=Navy][font=楷体_GB2312][求助]DNA Bisulfite处理以及甲基化特异PCR
求助群内有经验者:
在DNA Bisulfite 处理以及甲基化特异PCR的准备工作时候,遇到
2013年03月27日发布人:星星点灯
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各位大虾好~小女子本就外行,现初涉MSP,今有图一张,具体信息如下:
截取的复合图内,是同一批样本做的两个基因,上图是上周五做的,下图是今天的。
1,首先想要求证的是下图中小于100bp的诸多浅条带都是引物二聚体是
2015年08月01日发布人:wanglaoshi
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amplify 後再以酵素切能切動即是有甲基化(Nucleic Acids Research, 1997, Vol. 25, No. 12 2532–2534)[/size],[size=2]野生型引物能扩出条带来,是因为甲基化修饰不完全,修饰后的DNA中有野生型的DNA 。在进行MSP时往往要采用热启动PCR,使双链DNA充
2016年04月07日发布人:小荷尖尖
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Research, 1997, Vol. 25, No. 12 2532–2534)[/size],[size=2]
野生型引物能扩出条带来,是因为甲基化修饰不完全,修饰后的DNA中有野生型的DNA 。在进行MSP时往往要采用热启动PCR,使双链DNA充分解链,仅其中的一条链作为
2016年03月03日发布人:newway
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][b]我自己感觉是亚硫酸盐修饰不完全造成PCR产物里面,可能含有未转化的DNA样本,然后PCR扩增的时候扩增出了两种产物。 [/b][/font][/size][/color],BSP后其实PCR产物是不纯,所以需要转化连接挑克隆测序的。测序要多挑几个克隆,最好5.6个以上,算几率
2011年08月13日发布人:小荷尖尖